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超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)細(xì)胞破碎提取葉綠素的具體步驟

  更新時(shí)間:2017-10-18 點(diǎn)擊量:3491
  超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)細(xì)胞破碎提取葉綠素的具體步驟
  
  超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)是利用超聲波在液體中的分散效應(yīng),使液體產(chǎn)生空化的作用,從而使液體中的固體顆粒或細(xì)胞組織破碎。
  
  生物產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,應(yīng)用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)所做的實(shí)驗(yàn)要求也隨之提高,如對(duì)樣品溫度的測(cè)定、控制,低溫冷卻樣品及整機(jī)的智能化程度的提高等等,都提出了新的要求。
  
  超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)超聲波細(xì)胞破碎提取葉綠素的具體步驟:
  
  1.以離心或過濾水樣,在抽濾器上裝好乙酸纖維濾膜。倒人定量體積的水樣進(jìn)行抽濾,抽濾時(shí)負(fù)壓不能過大(約為50kPa)。水樣抽完后,繼續(xù)抽1一2min,以減少濾膜上的水分。如需短期保存1一2d時(shí),可放人普通冰箱冷凍,如需長(zhǎng)期保存(30d),則應(yīng)放人低溫冰箱(一20℃)保存。
  
  2.取出帶有浮游植物的濾膜,在冰箱內(nèi)低溫干燥6一8h,用剪刀剪碎后,放人5ml或10ml離心管中,加人3一4ml90%丙酮,使碎片浸人液面下,放人超聲波容器中用超聲波對(duì)樣品進(jìn)行細(xì)胞破碎。(不同時(shí)間、不同頻次來比較實(shí)驗(yàn),便于找出*破碎時(shí)間、頻次進(jìn)行方法統(tǒng)一)。
  
  3.將超聲波進(jìn)行細(xì)胞破碎的樣品用離心機(jī)(3000一4000r/min)離心10min。將上清液倒人5ml或10ml容量瓶中。用90%的丙酮定容為5ml或10ml,搖勻。
  
  4.將上清液在分光光度計(jì)上,用1cm光程的比色皿,分別讀取750nm,663nm,645nm,630nm波長(zhǎng)的吸光度,并以90%的丙酮作空白吸光度測(cè)定,對(duì)樣品吸光度進(jìn)行校正。